細(xì)胞培養(yǎng)過程中遇到這些情況應(yīng)該如何處理

1.細(xì)胞經(jīng)過運(yùn)輸后，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈撞擊死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞，再900-1000rpm(約150g)離心3min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時(shí)碎片比較少，傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。

2.細(xì)胞生長(zhǎng)不均時(shí)，可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。

3.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢時(shí)，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（最高不超過20%），也可以根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4.不同細(xì)胞貼壁性差異比較大，所以消化時(shí)間差別較大，20s-10min均有可能，具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準(zhǔn)，嚴(yán)禁消化到細(xì)胞漂浮?？蛻粝^度導(dǎo)致細(xì)胞死亡、漂浮、生長(zhǎng)緩慢，不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

5.干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

6.細(xì)胞狀態(tài)正常時(shí)，應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種，凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測(cè)凍存效果。我方不對(duì)客戶凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé)，客戶凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。