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類胡蘿卜素(carotenoid)含量試劑盒說明書

發布時間:2023/9/19點擊次數:1168

類胡蘿卜素(carotenoid)含量試劑盒說明書

微量法100管/96樣

 

注   意 :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

 

測定意義:

類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營養特性的化合物,給植物和動物提供天然色素,是重要的抗氧化劑,并有能力轉換為必需維生素。類胡蘿卜素可預防細胞,組織和基因損毀,增強身體免疫系統,抵御感染,減少癌癥風險,保護心臟。

 

測定原理:

樣品通過混合有機溶劑萃取,類胡蘿卜素與非類胡蘿卜素成分分離,在440nm處有特征吸收峰。

 

自備實驗用品及儀器:

天平、烘箱,100目篩、三角瓶或燒杯、漏斗,紗布、玻璃試管、可見分光光度計/酶標儀。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體100mL×20瓶,4℃保存。

試劑二:液體100mL×10瓶。4℃保存。

提取液:臨用前可按照試劑一(V):試劑二(V)= 2:1混勻,封口膜封緊,防止揮發,配置好的提取液4℃保存。

 

樣本處理:

組織樣品:60℃烘干粉碎,過100目篩,稱約0.01g,加2mL提取液,37℃振蕩提取60min。

 

測定操作表:

 


空白管

測定管

樣本(μL)


1000

提取液(μL)

1000


迅速測定440nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管

 

注意:空白管只需測定一次。

 

計算公式:

類胡蘿卜素含量(μg/g)= △A×V樣總÷(ε×d)÷W×1000

 = 1.6×△A÷W

V樣總:提取液總體積,2mL;ε:類胡蘿卜素經驗吸光系數,2500;d:光徑,0.5cm; W:樣本質量,g

 

 

注意事項:

1.        提取液易揮發,有毒性,操作時做好防護措施。

2.        測定必須能迅速,防止揮發造成誤差。

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