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植物總酚(Total Phenols,TP)試劑盒說明書

發(fā)布時(shí)間:2023/11/9點(diǎn)擊次數(shù):1550

植物總酚(Total PhenolsTP)試劑盒說明書

                                                     微量法100T/48S

  正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。

測(cè)定原理:

在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測(cè)760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:60%乙醇,自備。

試劑一:液體3mL×1瓶,4保存。

試劑二:液體5mL×1瓶,4保存。

總酚提取:

直接檢測(cè)

測(cè)定操作表:

1、   分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm,蒸餾水調(diào)零。

2、   操作表


對(duì)照管

測(cè)定管

樣本待測(cè)液(µL

10

10

試劑一(µL


50

混勻,25℃靜置2min

試劑二(µL

50

50

H2OµL

140

90

混勻,25℃靜置10 min,于微量石英比色皿/96孔板中,測(cè)定760nm吸光值,ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。

總酚含量計(jì)算公式:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.808x+0.0012R2 = 0.9994

總酚含量(mg/g 干重)=ΔA-0.0012 ÷2.808

                    = 0.356×ΔA–0.0012

注意事項(xiàng):

1. 吸光值大于2,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

2. 試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。

3. Z低檢出限為2.4 μg/g


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