LWnt-3A小鼠皮下結締組織細胞是由L-M(TK-)細胞用Wnt-3A表達載體轉染并在含G418的培養基中篩選出的穩轉株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白,Wnt基因控制胚胎發過程中的許多模式形成和生長事件。L Wnt-3A細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白,L Wnt-3A細胞是目前生產Wnt-3A條件培養基的最好來源。
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LWnt-3A小鼠皮下結締組織細胞
簡稱:LWnt-3A
中文名:小鼠皮下結締組織細胞
別名:L-Wnt-3A; L-Wnt3A; LWnt3A; LWnt-3A
種屬:小鼠
來源:皮下結締組織;自發永生;雄性;C3H/An
培養基:1640
狀態:貼壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
細胞培養操作步驟:
1. 吸走多余培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞*漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3. 加入6-8ml*培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4. 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液:92%*培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
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