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血清高密度脂蛋白(HDL-C)試劑盒說明書

發布時間:2023/5/11點擊次數:547

血清高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol , HDL-C)試劑盒說明書

微量法100/96


   正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

高密度脂蛋白血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的膽固醇,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,是一種抗動脈粥樣硬化血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫",對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。

 

測定原理:

用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉化為FC進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。

 

需自備的儀器和用品:

離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。

試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。

標準品:液體1mL×1支,4℃保存。

 

樣品處理:

取血后3小時內分離血清,將血清樣品與試劑一按照1:1的比例充分混勻,25℃靜置15min2000g離心15min,上清置于冰上待測。

 

測定操作表:

 


空白管

標準管

測定管

蒸餾水(μL

4



標準品(μL


4


樣本(μL



4

試劑二(μL

150

150

150

試劑三(μL

50

50

50

混勻,37℃靜置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管調零,測定500nm處吸光值A。分別記為A標準管和A測定管

 

計算公式:

a.   用微量石英比色皿測定的計算公式如下

HDL-C含量(mmol/L= A測定管÷A標準管×C標準管

                     =5×A測定管÷A標準管

C標準管:5mmol/L

b96孔板測定的計算公式如下

HDL-C含量(mmol/L= A測定管÷A標準管×C標準管

                     =5×A測定管÷A標準管

C標準管:5mmol/L

 

注意事項:

1. 樣本切勿反復凍融,最好在取血后12小時內完成測定。

2. 配置好的試劑三4℃保存可半個月。

3. 線性范圍為0.15mmol/L-3.8mmol/L

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