大鼠骨外膜細胞

產品簡介
大鼠骨外膜細胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。

產品型號：復蘇/凍存

更新時間：2024-07-10

廠商性質：生產廠家

訪問量：431

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大鼠骨外膜細胞

產品名稱：大鼠骨外膜細胞

產品貨號：YLK-XB1232h

組織來源：骨組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

細胞簡介：

骨外膜細胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。

這兩種細胞作用相反又相互依據。成骨細胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構，并且還負責拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下，兩種細胞之間處于動態的平衡之中，完成骨的生長發育的新陳代謝。骨折之后，成骨細胞首先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復了骨的連續性，往往不符合生物力學的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。

質量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態最佳

傳代比例： 1:2

消化液： 0.25% 胰蛋白/酶

培養條件：氣相：空氣，95% ；C O2，5%

該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。

4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細胞收貨脫落

1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。

3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。

4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。

5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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